代謝物免疫印跡檢測（Western Blot）

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信息概要

代謝物免疫印跡檢測（Western Blot）是一種廣泛應用于蛋白質檢測的高特異性技術，通過抗體與目標蛋白的結合實現對特定代謝物的定性與半定量分析。該技術結合了電泳分離與免疫檢測的優勢，能夠精確識別低豐度蛋白，在疾病診斷、生物標志物篩選、藥物研發及基礎研究中具有重要價值。第三方檢測機構提供專業、高效的Western Blot服務，確保數據準確性和可重復性，為客戶提供可靠的科研與臨床支持。

檢測項目

葡萄糖轉運蛋白GLUT1, 脂肪酸合成酶FASN, 丙酮酸激酶PKM2, 乳酸脫氫酶LDH, 乙酰輔酶A羧化酶ACC, 磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶PEPCK, 蘋果酸酶ME1, 己糖激酶HK2, 三磷酸腺苷合酶ATP5A, 琥珀酸脫氫酶SDHB, 細胞色素C氧化酶COX4, 過氧化物酶體增殖物激活受體PPARγ, 哺乳動物雷帕霉素靶蛋白mTOR, 腺苷酸活化蛋白激酶AMPK, 缺氧誘導因子HIF-1α, 核因子κB p65, 白細胞介素IL-6, 腫瘤壞死因子TNF-α, 轉化生長因子TGF-β, 胰島素受體底物IRS1

檢測范圍

糖代謝相關蛋白, 脂代謝相關蛋白, 氨基酸代謝相關蛋白, 能量代謝相關酶, 信號通路調控蛋白, 炎癥因子, 細胞因子, 氧化應激標志物, 線粒體功能蛋白, 轉錄因子, 表觀遺傳修飾酶, 自噬相關蛋白, 凋亡相關蛋白, 細胞周期調控蛋白, 受體酪氨酸激酶, 膜轉運蛋白, 免疫檢查點蛋白, 腫瘤標志物, 神經遞質合成酶, 激素受體

檢測方法

SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）：通過變性電泳分離蛋白質混合物。

濕式轉印法：將凝膠中的蛋白轉移至PVDF或NC膜。

半干轉印法：快速高效的蛋白轉印技術。

封閉處理：使用BSA或脫脂牛奶阻斷非特異性結合位點。

一抗孵育：特異性識別目標蛋白的一級抗體反應。

二抗孵育：標記酶或熒光基團的二級抗體放大信號。

化學發光法（ECL）：通過辣根過氧化物酶催化發光底物檢測。

熒光Western Blot：采用熒光標記二抗進行多色檢測。

定量分析：通過灰度掃描和軟件計算蛋白表達量。

內參校正：使用β-actin或GAPDH等管家蛋白標準化數據。

磷酸化蛋白檢測：針對磷酸化位點的特異性抗體分析。

糖基化蛋白檢測：通過凝集素或糖基化抗體識別修飾。

膜蛋白提取：采用去垢劑處理分離膜結合蛋白。

低豐度蛋白富集：免疫沉淀預處理提高檢測靈敏度。

多重檢測：同一膜上同時分析多個目標蛋白。

檢測儀器

垂直電泳槽, 轉印裝置, 化學發光成像系統, 熒光掃描儀, 微量分光光度計, 離心機, 恒溫搖床, 微波爐, 磁力攪拌器, pH計, 電子天平, 超純水系統, 微量移液器, 凝膠成像系統, 低溫高速離心機

實驗儀器

測試流程

注意事項

1.具體的試驗周期以工程師告知的為準。

2.文章中的圖片或者標準以及具體的試驗方案僅供參考，因為每個樣品和項目都有所不同，所以最終以工程師告知的為準。

3.關于（樣品量）的需求，最好是先咨詢我們的工程師確定，避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗周期一般是五個工作日左右，部分樣品有所差異

5.如果對于（代謝物免疫印跡檢測（Western Blot））還有什么疑問，可以咨詢我們的工程師為您一一解答。