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硫酸鹽還原菌(Sulfate-Reducing Bacteria, SRB)殘余菌屬的檢測是環境監測、工業水處理、油田腐蝕防控等領域的重要環節。以下是關于SRB殘余菌屬檢測的詳細方法和注意事項:
一、檢測方法
1. 傳統培養法
- 原理:利用選擇性培養基(如Postgate培養基)在厭氧條件下培養SRB,通過觀察黑色沉淀(FeS)或檢測硫化氫(H?S)生成判斷存在。
- 步驟:
- 樣本采集(水樣、沉積物等)并稀釋。
- 接種至含硫酸鹽、乳酸鈉、亞鐵離子的培養基中。
- 在25-37℃厭氧條件下培養7-14天。
- 觀察黑色沉淀或使用醋酸鉛試紙檢測H?S。
- 優點:成本低,特異性高。
- 缺點:耗時長,靈敏度低,無法檢測不可培養的SRB。
2. 分子生物學方法
- PCR/qPCR檢測:
- 靶基因:16S rRNA基因(屬/種特異性引物)、dsrAB(硫酸鹽還原關鍵酶基因)。
- 步驟:DNA提取 → PCR擴增 → 電泳或熒光定量分析。
- 優點:快速(數小時)、高靈敏度,可檢測低豐度菌群。
- 缺點:需專業設備,無法區分死菌/活菌。
- 活菌檢測技術:
- PMA-qPCR:使用疊氮溴化丙啶(PMA)預處理樣本,選擇性抑制死菌DNA擴增,僅檢測活菌。
- mRNA檢測:檢測功能基因(如dsrA)的mRNA,反映代謝活性。
3. 代謝產物檢測
- 化學分析法:
- H?S檢測:使用亞甲基藍分光光度法或氣相色譜法。
- 硫酸鹽消耗量:離子色譜法測定硫酸鹽濃度變化。
- 生物傳感器:基于SRB代謝產生的H?S或電化學信號開發快速檢測裝置。
4. 高通量測序技術
- 宏基因組/宏轉錄組測序:
- 分析樣本中SRB的遺傳物質,識別菌屬組成及功能活性。
- 適用場景:復雜環境中SRB群落結構解析。
二、樣本處理要點
- 采集與保存:
- 使用無菌容器,避免氧氣接觸(厭氧環境保存)。
- 水樣:低溫(4℃)保存并盡快檢測;沉積物需均質化處理。
- 前處理:
- 濃縮:通過過濾(水樣)或離心富集微生物。
- 去除抑制劑:如腐殖酸(土壤樣本需DNA純化試劑盒處理)。
三、方法選擇建議
- 快速篩查:qPCR或生物傳感器。
- 活菌檢測:PMA-qPCR或mRNA分析。
- 科研級分析:宏基因組測序+FISH(熒光原位雜交)。
- 工業現場監測:H?S化學檢測或商業試劑盒(如HYDROGEN™ SRB檢測套件)。
四、注意事項
- 避免污染:分子實驗需嚴格分區操作(樣本處理、PCR、電泳分離區)。
- 厭氧條件:培養法和樣本保存需維持無氧環境(如厭氧罐、氮氣置換)。
- 標準曲線:qPCR需使用已知濃度SRB DNA建立標準曲線,確保定量準確。
- 交叉驗證:建議結合培養法與分子法提高結果可靠性。
五、應用場景
- 油田系統:監測注水管道中SRB活性,預防微生物腐蝕(MIC)。
- 污水處理:評估厭氧處理單元中SRB的脫硫效率。
- 環境修復:檢測土壤/地下水中的SRB殘留,評估硫酸鹽污染修復效果。
通過上述方法組合,可全面評估環境中SRB殘余菌屬的豐度、活性及潛在風險,為工業防護和生態管理提供科學依據。
實驗儀器
測試流程

注意事項
1.具體的試驗周期以工程師告知的為準。
2.文章中的圖片或者標準以及具體的試驗方案僅供參考,因為每個樣品和項目都有所不同,所以最終以工程師告知的為準。
3.關于(樣品量)的需求,最好是先咨詢我們的工程師確定,避免不必要的樣品損失。
4.加急試驗周期一般是五個工作日左右,部分樣品有所差異
5.如果對于(硫酸鹽還原菌殘余菌屬檢測)還有什么疑問,可以咨詢我們的工程師為您一一解答。