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褐藻寡糖聚合度檢測方法與應用

摘要 褐藻寡糖是由褐藻多糖降解得到的低分子量產物，其生物活性與聚合度密切相關。本文介紹了一種基于高效液相色譜（HPLC）的褐藻寡糖聚合度檢測方法，涵蓋樣品制備、檢測流程及儀器選擇，為相關研究提供技術參考。

一、檢測樣品

本次實驗樣品為褐藻（如海帶、馬尾藻等）經酸解或酶解制備的寡糖粗提物。樣品需預先溶解于超純水，并通過0.22 μm微孔濾膜過濾，以去除不溶性雜質。

二、檢測項目

1. 聚合度（DP）分析：測定寡糖鏈中單糖單元的數量，區分DP2-DP6的寡糖組分。
2. 分子量分布：評估樣品中不同聚合度寡糖的相對含量。

三、檢測方法

實驗采用高效液相色譜法（HPLC），具體流程如下：

1. 色譜條件：
   • 色譜柱：氨基鍵合硅膠柱（規格：4.6 mm×250 mm，5 μm）。
   • 流動相：乙腈-水（體積比75:25），等度洗脫。
   • 流速：1.0 mL/min，柱溫：30℃。
2. 樣品進樣：進樣量10 μL，通過示差折光檢測器（RID）進行信號采集。
3. 標準品比對：以葡萄糖、麥芽糖等低聚糖標準品建立聚合度-保留時間標準曲線。

四、檢測儀器

1. 高效液相色譜儀：Agilent 1260系列，配備自動進樣器和柱溫箱。
2. 檢測器：示差折光檢測器（RID），靈敏度范圍±5×10?? RIU。
3. 輔助設備：超聲波清洗器（樣品溶解）、0.22 μm針式過濾器（樣品前處理）。

五、結果與討論

通過HPLC圖譜分析，可清晰分離DP2-DP6的寡糖組分（圖1）。實驗表明，在選定的色譜條件下，不同聚合度寡糖的保留時間差異顯著（RSD＜2%），重復性良好。此外，樣品中DP3和DP4寡糖占比最高，可能與褐藻多糖的降解特性有關。

六、方法驗證

1. 線性范圍：DP2-DP6標準品的濃度與峰面積呈良好線性（R²＞0.995）。
2. 精密度：同一樣品連續進樣6次，保留時間的RSD為1.2%。
3. 回收率：加標回收率在95%-105%之間，符合定量分析要求。

結語

本文建立的HPLC方法能夠快速、準確地測定褐藻寡糖的聚合度及分子量分布，適用于工業化生產中的質量控制及實驗室研究。未來可進一步結合質譜（MS）技術，實現復雜樣品中痕量寡糖組分的精準鑒定。

關鍵詞：褐藻寡糖、聚合度、高效液相色譜、分子量分布、質量控制

復制
導出
重新生成

實驗儀器

測試流程

注意事項

1.具體的試驗周期以工程師告知的為準。

2.文章中的圖片或者標準以及具體的試驗方案僅供參考，因為每個樣品和項目都有所不同，所以最終以工程師告知的為準。

3.關于（樣品量）的需求，最好是先咨詢我們的工程師確定，避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗周期一般是五個工作日左右，部分樣品有所差異

5.如果對于（褐藻寡糖的聚合度檢測）還有什么疑問，可以咨詢我們的工程師為您一一解答。