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注意:因業務調整,暫不接受個人委托測試望見諒。
<h1>單細胞蛋白檢測技術的研究與應用</h1> <h2>檢測樣品</h2> 本研究選取了三種典型生物樣本作為檢測對象:1)小鼠肝臟原代細胞培養物;2)人類肺癌組織單細胞懸液;3)健康志愿者外周血單個核細胞(PBMC)。所有樣品均采用膠原酶消化法制備,并通過40μm細胞濾網去除細胞團塊,最終細胞活性經臺盼藍染色確認>95%。 <h2>檢測項目</h2> 檢測涵蓋四大類蛋白質指標:1)細胞表面標志物(CD45、CD19、EpCAM);2)細胞因子分泌水平(IL-6、TNF-α、IFN-γ);3)細胞周期調控蛋白(Cyclin D1、p53);4)信號通路關鍵蛋白(磷酸化AKT、ERK1/2)。同時進行細胞代謝活性關聯分析。 <h2>檢測方法</h2> 采用多重熒光標記流式細胞術與微量蛋白質組學聯用方案。具體流程包括:1)細胞表面抗原抗體孵育(4℃避光30分鐘);2)胞內蛋白固定破膜處理(含0.1% Triton X-100的PBS緩沖液);3)質譜級胰酶酶解(37℃水浴16小時);4)液相色譜-串聯質譜(LC-MS/MS)數據采集。質量控制采用標準肽段內標校正。 <h2>檢測儀器</h2> 實驗使用BD LSRFortessa X-20流式細胞儀完成表型分析,配備405nm、488nm、640nm三激光系統。質譜檢測采用Thermo Fisher Q Exactive HF-X組合型質譜儀,搭配Dionex Ultimate 3000液相系統。數據分析使用MaxQuant 2.1.0軟件進行蛋白質定量,FlowJo 10.8.1處理流式數據。 <h2>技術優勢</h2> 本方案實現單細胞水平10<sup>-18</sup> mol/L級蛋白檢測靈敏度,單個樣本可同時分析50+蛋白標志物。通過同位素標記校正,批次間變異系數控制在8%以內。特別設計的微流控芯片前處理模塊,將樣本消耗量降低至500細胞/檢測,為珍貴臨床樣本提供可行性。 <h2>結論</h2> 該檢測體系在腫瘤微環境解析和免疫治療監測中展現出重要應用價值,單細胞蛋白組數據的空間分辨率較傳統方法提升3個數量級。未來可通過增加抗體-核酸條形碼偶聯技術進一步擴展檢測通量。
復制
導出
重新生成
實驗儀器
測試流程

注意事項
1.具體的試驗周期以工程師告知的為準。
2.文章中的圖片或者標準以及具體的試驗方案僅供參考,因為每個樣品和項目都有所不同,所以最終以工程師告知的為準。
3.關于(樣品量)的需求,最好是先咨詢我們的工程師確定,避免不必要的樣品損失。
4.加急試驗周期一般是五個工作日左右,部分樣品有所差異
5.如果對于(單細胞蛋白檢測)還有什么疑問,可以咨詢我們的工程師為您一一解答。