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細胞增殖檢測

原創發布者:北檢院    發布時間:2025-04-08     點擊數:

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細胞增殖檢測:原理、方法與實驗流程

檢測樣品

細胞增殖檢測的樣品主要包括體外培養的細胞系、原代細胞、藥物處理后的細胞樣本以及基因編輯后的細胞模型。常見的樣品類型涵蓋腫瘤細胞(如HeLa、A549)、干細胞、免疫細胞(如T細胞)以及經特定化合物或生物因子刺激后的細胞群體。樣品需滿足無菌、活性良好且濃度適宜(通常為1×10^4至1×10^5 cells/mL)的要求。

檢測項目

細胞增殖檢測的核心目標是量化細胞在特定條件下的生長速率和分裂能力。主要檢測項目包括:

  1. 細胞活力分析:評估細胞存活率與代謝活性;
  2. 增殖曲線繪制:通過連續監測細胞數量變化,反映增殖動力學特征;
  3. 細胞周期分布:分析細胞處于G1、S、G2/M期的比例;
  4. 克隆形成能力:測定單個細胞形成細胞集落的潛力。

檢測方法

目前主流的細胞增殖檢測方法包括以下四種: 1. CCK-8法 基于水溶性四唑鹽(WST-8)的還原反應,通過檢測450 nm波長處的吸光度值,間接反映活細胞數量。該方法操作簡便,適用于高通量篩選。

2. MTT法 利用MTT試劑被線粒體脫氫酶還原為紫色結晶物的特性,通過溶解結晶后測量570 nm吸光度值,評估細胞增殖狀態。需注意MTT對細胞具有毒性,需嚴格控制孵育時間。

3. BrdU標記法 通過摻入胸腺嘧啶類似物BrdU,結合特異性抗體與熒光標記,定量檢測DNA合成活躍的細胞比例。此方法適用于精準分析S期細胞占比。

4. 流式細胞術 采用碘化丙啶(PI)或DAPI染色,結合流式細胞儀分析細胞周期分布,或通過CFSE染料追蹤細胞分裂代數,實現動態增殖監測。

檢測儀器

細胞增殖檢測依賴以下關鍵儀器設備:

  1. 酶標儀(如BioTek Synergy H1):用于讀取CCK-8、MTT等試劑的吸光度數據;
  2. 流式細胞儀(如BD FACSCanto II):完成細胞周期分析或CFSE標記檢測;
  3. 倒置顯微鏡(如Olympus IX73):觀察細胞形態與克隆形成情況;
  4. CO2培養箱(如Thermo Fisher Heracell 150i):維持細胞培養環境穩定。

總結

細胞增殖檢測是評估藥物效果、基因功能及環境因素對細胞生長影響的核心實驗技術。通過合理選擇檢測方法與儀器,研究人員能夠高效獲取細胞增殖的動態數據,為腫瘤學、免疫學及再生醫學等領域的研究提供關鍵支持。


復制
導出
重新生成

實驗儀器

實驗室儀器 實驗室儀器 實驗室儀器 實驗室儀器

測試流程

細胞增殖檢測流程

注意事項

1.具體的試驗周期以工程師告知的為準。

2.文章中的圖片或者標準以及具體的試驗方案僅供參考,因為每個樣品和項目都有所不同,所以最終以工程師告知的為準。

3.關于(樣品量)的需求,最好是先咨詢我們的工程師確定,避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗周期一般是五個工作日左右,部分樣品有所差異

5.如果對于(細胞增殖檢測)還有什么疑問,可以咨詢我們的工程師為您一一解答。

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