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細胞代謝組檢測技術與應用分析

檢測樣品

本研究選取了哺乳動物細胞系（HEK293、HepG2）及原代小鼠肝細胞作為檢測樣本。所有樣品均通過無菌培養技術處理，培養條件為37℃、5% CO?環境，培養基為含10%胎牛血清的DMEM高糖培養基。樣品在收集后立即進行液氮速凍，并于-80℃超低溫冰箱中保存，運輸過程使用干冰維持低溫環境，確保代謝物穩定性。

檢測項目

本次代謝組檢測涵蓋氨基酸、糖類、有機酸、核苷酸、脂質及次級代謝產物等六大類目標物，總計分析超過500種代謝物。重點檢測項目包括：

• 能量代謝相關物質（如ATP、NADH、乳酸）；
• 氧化應激標志物（谷胱甘肽、丙二醛）；
• 信號轉導分子（cAMP、IP3）；
• 細胞增殖與凋亡關聯代謝物（精胺、亞精胺、鞘氨醇）。

檢測方法

采用**液相色譜-質譜聯用技術（LC-MS/MS）**進行代謝組學分析，具體流程如下：

1. 樣品前處理：細胞裂解后使用80%甲醇水溶液提取代謝物，離心去除蛋白沉淀，上清液經真空濃縮后復溶；
2. 色譜分離：選用C18反相色譜柱（2.1×100 mm, 1.7 μm），流動相為0.1%甲酸水溶液和乙腈，梯度洗脫時長20分鐘；
3. 質譜檢測：采用電噴霧電離（ESI）源，正負離子模式切換掃描，質量掃描范圍m/z 50-1000；
4. 數據分析：通過Compound Discoverer 3.1軟件進行峰提取、代謝物鑒定及通路富集分析。

檢測儀器

實驗主要依賴以下高精度儀器完成：

• 超高效液相色譜儀：Waters ACQUITY UPLC H-Class系統，配備自動進樣器和柱溫箱；
• 高分辨質譜儀：Thermo Scientific Q Exactive HF-X Hybrid Quadrupole-Orbitrap，質量精度<3 ppm；
• 輔助設備：Eppendorf Centrifuge 5430R高速冷凍離心機、Labconco FreeZone真空濃縮儀。

結語

細胞代謝組檢測能夠系統性解析生理或病理狀態下的代謝網絡變化，為疾病機制研究、藥物靶點篩選及精準醫療提供關鍵數據支持。本研究通過標準化的檢測流程與先進儀器平臺，實現了對細胞代謝狀態的全面表征，后續將進一步結合多組學數據開展深入分析。

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實驗儀器

測試流程

注意事項

1.具體的試驗周期以工程師告知的為準。

2.文章中的圖片或者標準以及具體的試驗方案僅供參考，因為每個樣品和項目都有所不同，所以最終以工程師告知的為準。

3.關于（樣品量）的需求，最好是先咨詢我們的工程師確定，避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗周期一般是五個工作日左右，部分樣品有所差異

5.如果對于（細胞代謝組檢測）還有什么疑問，可以咨詢我們的工程師為您一一解答。