細胞活性氧檢測

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細胞活性氧（ROS）檢測技術解析

導語 活性氧（Reactive Oxygen Species, ROS）是細胞代謝過程中產生的一類具有強氧化性的小分子物質，其水平異常與多種疾病（如癌癥、神經退行性疾病等）密切相關。準確檢測細胞內ROS水平，對研究氧化應激機制、藥物篩選及毒性評價具有重要意義。本文重點介紹細胞活性氧檢測的實驗流程及技術要點。

一、檢測樣品

檢測樣品主要包括以下幾類：

1. 細胞系：如HeLa、HEK293、HepG2等常用細胞系。
2. 原代細胞：如從動物或人體組織中分離的神經元、肝細胞等。
3. 組織樣本：如凍存或新鮮組織切片中的細胞。
4. 藥物處理后的細胞：用于評價化合物對ROS生成或清除的影響。

樣品需預先進行標準化培養，確保細胞活率＞90%，并控制細胞密度（通常為1×10?~1×10?個/孔）。

二、檢測項目

檢測的核心項目為細胞內活性氧水平，具體包括：

• 基礎ROS水平：未處理細胞中ROS的基線濃度。
• 誘導/抑制ROS水平：通過氧化應激誘導劑（如H?O?）或抗氧化劑（如NAC）處理后的ROS變化。
• 動態監測：時間梯度或劑量依賴性的ROS生成趨勢。

三、檢測方法

目前主流的檢測方法為熒光探針法，以DCFH-DA（2&39;,7&39;-二氯二氫熒光素二乙酸酯）為例：

1. 探針加載：將DCFH-DA探針與細胞共孵育（濃度10-20 μM，時間30-60分鐘）。
2. 刺激處理：加入ROS誘導劑或抑制劑，設置對照組。
3. 熒光檢測：探針被ROS氧化后生成綠色熒光物質DCF，通過熒光強度定量ROS水平。

此方法靈敏度高、操作簡便，適用于高通量篩選。

四、檢測儀器

檢測過程需依賴以下儀器設備：

1. 熒光酶標儀：用于96孔板或384孔板的批量檢測（激發波長485 nm，發射波長535 nm）。
2. 流式細胞儀：單細胞水平分析ROS分布及異質性。
3. 激光共聚焦顯微鏡：實時觀察ROS的亞細胞定位（如線粒體、細胞質）。
4. 低溫離心機：用于細胞沉淀及探針清洗步驟。

結語 細胞活性氧檢測是氧化應激研究中的關鍵技術，其精準性依賴于樣品制備、探針選擇及儀器參數的優化。隨著新型熒光探針（如MitoSOX™針對線粒體ROS）的開發，該技術將進一步推動疾病機制與藥物研發領域的突破。

（如需進一步了解實驗方案或設備詳情，請聯系專業技術人員獲取支持。）

實驗儀器

測試流程

注意事項

1.具體的試驗周期以工程師告知的為準。

2.文章中的圖片或者標準以及具體的試驗方案僅供參考，因為每個樣品和項目都有所不同，所以最終以工程師告知的為準。

3.關于（樣品量）的需求，最好是先咨詢我們的工程師確定，避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗周期一般是五個工作日左右，部分樣品有所差異

5.如果對于（細胞活性氧檢測）還有什么疑問，可以咨詢我們的工程師為您一一解答。