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阿爾茲海默癥動物模型檢測研究
摘要 阿爾茲海默癥(Alzheimer&39;s Disease, AD)是一種以認知功能障礙和神經元退化為特征的神經退行性疾病。動物模型是研究AD病理機制及藥物開發的重要工具。本文基于轉基因AD模型小鼠,系統開展了病理學、行為學及分子生物學檢測,為AD研究提供數據支持。
檢測樣品
本研究以轉基因AD模型小鼠(APP/PS1雙轉基因小鼠)為實驗對象,同時設立野生型小鼠作為對照組。檢測樣品包括:
- 腦組織:取小鼠海馬及皮層組織,用于病理學及分子生物學分析。
- 血液及腦脊液:采集外周血及腦脊液樣本,用于炎癥因子及β-淀粉樣蛋白(Aβ)含量檢測。
- 行為學數據:通過行為學實驗記錄小鼠空間記憶及學習能力。
檢測項目
- 病理學檢測:
- Aβ斑塊沉積:檢測腦組織中Aβ斑塊的數量及分布。
- Tau蛋白過度磷酸化:分析Tau蛋白病理特征。
- 神經元丟失:評估海馬區神經元密度。
- 行為學檢測:
- 新物體識別實驗(NOR):評估短期記憶能力。
- Morris水迷宮(MWM):測試空間學習與長期記憶。
- 分子生物學檢測:
- Aβ40/Aβ42含量:通過ELISA定量分析腦脊液及血液中的Aβ亞型。
- 炎癥因子水平:檢測IL-6、TNF-α等炎癥標志物。
- 氧化應激指標:測定SOD活性及MDA含量。
檢測方法
- 免疫組織化學(IHC): 采用抗Aβ抗體和抗磷酸化Tau抗體標記腦組織切片,通過顯微鏡觀察斑塊及蛋白異常沉積。
- 酶聯免疫吸附試驗(ELISA): 定量檢測血液、腦脊液及腦勻漿中的Aβ40/Aβ42及炎癥因子含量。
- Western Blot: 分析海馬組織中Tau蛋白磷酸化水平及突觸相關蛋白(如PSD-95)表達。
- 實時熒光定量PCR(qPCR): 檢測APP、BACE1等AD相關基因的mRNA表達變化。
- 行為學實驗標準化流程:
- Morris水迷宮:連續5天訓練小鼠尋找隱藏平臺,第6天撤去平臺記錄穿越目標象限次數。
- 新物體識別:記錄小鼠探索新物體與舊物體的時間差異。
檢測儀器
- 病理學分析:
- 激光共聚焦顯微鏡(型號:Leica TCS SP8):用于高分辨率成像Aβ斑塊及神經元結構。
- 全自動切片掃描儀(型號:Hamamatsu NanoZoomer):實現腦組織切片數字化分析。
- 分子生物學檢測:
- 酶標儀(型號:BioTek Synergy H1):讀取ELISA板吸光度值。
- 蛋白質電泳系統(型號:Bio-Rad Mini-PROTEAN):用于Western Blot蛋白分離。
- 行為學記錄:
- 智能視頻追蹤系統(型號:EthoVision XT):自動分析小鼠運動軌跡及行為參數。
- 基因表達分析:
- 實時熒光定量PCR儀(型號:Applied Biosystems QuantStudio 5):檢測目標基因Ct值。
結論
通過上述檢測體系,本研究明確了APP/PS1小鼠模型中Aβ沉積、Tau病理及認知衰退的典型AD特征。病理學與行為學數據的結合為AD機制研究及藥物篩選提供了可靠依據。后續將進一步探索靶向Aβ清除或抗炎治療的干預效果。
關鍵詞:阿爾茲海默癥、動物模型、Aβ斑塊、Morris水迷宮、免疫組化
實驗儀器
測試流程

注意事項
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3.關于(樣品量)的需求,最好是先咨詢我們的工程師確定,避免不必要的樣品損失。
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