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氧化應激動物模型檢測

原創發布者:北檢院    發布時間:2025-04-09     點擊數:

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注意:因業務調整,暫不接受個人委托測試望見諒。

氧化應激動物模型檢測方法與分析

檢測樣品

實驗選用健康成年Sprague-Dawley(SD)大鼠作為研究對象,通過腹腔注射**叔丁基過氧化氫(t-BHP)**建立急性氧化應激模型。實驗組與對照組各10只,實驗組注射劑量為10 mg/kg體重的t-BHP,對照組注射等體積生理鹽水。實驗結束后,采集大鼠血清、肝臟組織及腦組織樣本,用于后續檢測分析。

檢測項目

檢測指標主要包括:

  1. 氧化損傷標志物:丙二醛(MDA)、蛋白質羰基化水平(PC)。
  2. 抗氧化酶活性:超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、過氧化氫酶(CAT)。
  3. 活性氧(ROS)水平:通過細胞或組織內ROS熒光探針標記進行定量。
  4. DNA氧化損傷:8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)含量。

檢測方法

  1. MDA檢測:采用硫代巴比妥酸(TBA)比色法。樣本與TBA試劑在酸性條件下加熱反應,生成紅色產物,通過分光光度計在532 nm波長處測定吸光度,計算MDA濃度。
  2. SOD、GSH-Px、CAT活性測定:使用商品化試劑盒(如南京建成生物工程研究所生產),通過酶促反應動力學法檢測。例如,SOD活性通過抑制鄰苯三酚自氧化速率計算,GSH-Px活性基于谷胱甘肽氧化還原反應測定。
  3. ROS檢測:組織樣本經DCFH-DA熒光探針孵育后,通過流式細胞儀或熒光酶標儀(激發波長488 nm,發射波長525 nm)檢測熒光強度。
  4. 8-OHdG定量:采用酶聯免疫吸附法(ELISA),使用特異性單克隆抗體包被微孔板,通過標準曲線計算樣本中8-OHdG含量。

檢測儀器

  1. 分光光度計:UV-1800型紫外可見分光光度計(日本島津公司),用于MDA、SOD等吸光度測定。
  2. 酶標儀:Synergy HTX多功能酶標儀(美國BioTek公司),適用于ELISA及熒光信號檢測。
  3. 流式細胞儀:BD FACSCanto II(美國BD公司),用于細胞或組織內ROS水平的精確分析。
  4. 高速低溫離心機:Centrifuge 5424R(德國Eppendorf公司),用于樣本前處理。
  5. 組織勻漿器:TissueLyser LT(德國Qiagen公司),用于肝臟及腦組織破碎。

總結

通過上述檢測方法及儀器,可全面評估氧化應激動物模型中氧化損傷程度與抗氧化防御系統的變化。此類研究為揭示氧化應激相關疾病的分子機制及藥物開發提供了重要實驗依據。

實驗儀器

實驗室儀器 實驗室儀器 實驗室儀器 實驗室儀器

測試流程

氧化應激動物模型檢測流程

注意事項

1.具體的試驗周期以工程師告知的為準。

2.文章中的圖片或者標準以及具體的試驗方案僅供參考,因為每個樣品和項目都有所不同,所以最終以工程師告知的為準。

3.關于(樣品量)的需求,最好是先咨詢我們的工程師確定,避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗周期一般是五個工作日左右,部分樣品有所差異

5.如果對于(氧化應激動物模型檢測)還有什么疑問,可以咨詢我們的工程師為您一一解答。

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