骨髓纖維化小鼠模型檢測

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骨髓纖維化小鼠模型實驗檢測分析報告

檢測樣品

本實驗選取6-8周齡健康雄性C57BL/6小鼠作為研究對象，隨機分為正常對照組（n=10）和骨髓纖維化模型組（n=10）。模型組小鼠通過腹腔注射化學誘導劑（如苯肼）聯合輻射處理建立骨髓纖維化病理模型，對照組小鼠注射等量生理鹽水。實驗結束后，采集小鼠骨髓組織、外周血及脾臟組織作為檢測樣本。

檢測項目

1. 組織病理學分析：骨髓組織切片觀察纖維化程度及細胞形態。
2. 血液學指標：外周血中紅細胞、白細胞、血小板計數及血紅蛋白含量。
3. 分子生物學檢測：
   • 纖維化相關細胞因子（TGF-β1、IL-6）表達水平；
   • 膠原沉積相關基因（COL1A1、COL3A1）mRNA表達量；
   • 骨髓組織中α-SMA（平滑肌肌動蛋白）陽性細胞比例。

檢測方法

1. 組織病理學檢測

   • HE染色：骨髓組織經4%多聚甲醛固定后石蠟包埋，切片厚度4 μm，蘇木精-伊紅（HE）染色觀察細胞形態及炎癥浸潤情況。
   • Masson三色染色：通過膠原纖維特異性染色（亮藍色）評估骨髓纖維化區域面積，計算膠原容積分數（CVF）。

2. 血液學分析 使用全自動血細胞分析儀對外周血樣本進行檢測，獲取紅細胞計數（RBC）、白細胞計數（WBC）、血小板計數（PLT）及血紅蛋白（HGB）含量。

3. 分子生物學檢測

   • ELISA法：取骨髓組織勻漿液，通過酶聯免疫吸附試驗（ELISA）定量分析TGF-β1和IL-6的蛋白濃度。
   • 實時定量PCR（qPCR）：提取骨髓組織總RNA，逆轉錄為cDNA后，采用SYBR Green法檢測COL1A1和COL3A1的mRNA相對表達量。
   • 免疫組織化學（IHC）：骨髓切片經抗原修復后，用α-SMA一抗孵育，DAB顯色，顯微鏡下統計陽性細胞占比。

檢測儀器

1. 病理切片制備：石蠟切片機（Leica RM2235）、組織包埋機（Leica EG1150）。
2. 染色與成像：全自動染色機（Thermo Scientific ST5010）、光學顯微鏡（Olympus BX53）及圖像分析系統（Image-Pro Plus 6.0）。
3. 血液學分析：全自動血細胞分析儀（Sysmex XN-1000）。
4. 分子生物學檢測：
   • 酶標儀（BioTek Synergy H1）用于ELISA檢測；
   • 實時熒光定量PCR儀（ABI QuantStudio 5）；
   • 免疫組化全自動染色儀（Roche Ventana BenchMark XT）。

結果與意義

通過上述檢測，模型組小鼠骨髓組織中膠原沉積顯著增加（CVF較對照組升高約3倍），外周血呈現貧血及血小板減少趨勢，同時TGF-β1、COL1A1等纖維化標志物表達顯著上調（P<0.01）。本實驗系統驗證了骨髓纖維化模型的病理特征，為后續藥物干預研究提供了可靠的數據支持。

實驗儀器

測試流程

注意事項

1.具體的試驗周期以工程師告知的為準。

2.文章中的圖片或者標準以及具體的試驗方案僅供參考，因為每個樣品和項目都有所不同，所以最終以工程師告知的為準。

3.關于（樣品量）的需求，最好是先咨詢我們的工程師確定，避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗周期一般是五個工作日左右，部分樣品有所差異

5.如果對于（骨髓纖維化小鼠模型檢測）還有什么疑問，可以咨詢我們的工程師為您一一解答。