流式細胞檢測細胞因子檢測

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流式細胞術在細胞因子檢測中的應用

檢測樣品

本研究采用的檢測樣品為健康志愿者及疾病患者的外周血單核細胞（PBMC）。樣品通過密度梯度離心法分離獲得，并置于含抗凝劑的試管中保存。所有樣本均經過嚴格的質量控制，確保細胞活率≥95%，且無微生物污染。

檢測項目

檢測涵蓋多種關鍵細胞因子，包括：

• IL-2（白介素-2）：參與T細胞增殖與免疫調節；
• IL-4（白介素-4）：調控B細胞分化及抗體產生；
• IL-6（白介素-6）：介導炎癥反應及急性期蛋白合成；
• IFN-γ（干擾素-γ）：增強抗原呈遞及抗病毒免疫；
• TNF-α（腫瘤壞死因子-α）：誘導細胞凋亡及炎癥級聯反應。

檢測方法

1. 細胞刺激與固定：將PBMC置于含細胞刺激劑（如PMA/Ionomycin）的培養液中孵育4-6小時，激活細胞內細胞因子的分泌。
2. 表面標記染色：使用熒光標記抗體（如CD3、CD4、CD8）對細胞表面抗原進行標記，區分T細胞亞群。
3. 細胞內染色：通過破膜劑處理細胞，加入針對目標細胞因子的熒光抗體（如PE-Cy7標記的IL-2抗體），避光孵育30分鐘。
4. 流式檢測：使用流式細胞儀采集數據，通過前向散射（FSC）和側向散射（SSC）區分細胞形態，結合熒光信號分析特定細胞亞群的細胞因子表達水平。

檢測儀器

本研究采用BD FACSCanto™ II流式細胞儀（美國BD公司），配備三激光（488 nm、633 nm、405 nm）及八色檢測通道。儀器校準通過標準微球（BD™ Cytometer Setup Beads）完成，確保熒光信號穩定性。數據分析使用FlowJo™ v10.8軟件，通過設門策略排除碎片及死細胞干擾，定量細胞因子陽性細胞比例及平均熒光強度（MFI）。

結論

流式細胞術可高效檢測多參數細胞因子表達，為免疫狀態評估及疾病機制研究提供精準數據支持。本方法具有高靈敏度、多指標同步分析的優勢，適用于臨床研究與藥物開發領域。

實驗儀器

測試流程

注意事項

1.具體的試驗周期以工程師告知的為準。

2.文章中的圖片或者標準以及具體的試驗方案僅供參考，因為每個樣品和項目都有所不同，所以最終以工程師告知的為準。

3.關于（樣品量）的需求，最好是先咨詢我們的工程師確定，避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗周期一般是五個工作日左右，部分樣品有所差異

5.如果對于（流式細胞檢測細胞因子檢測）還有什么疑問，可以咨詢我們的工程師為您一一解答。