內皮細胞流式檢測

獲取試驗方案？獲取試驗報價？獲取試驗周期？

注意：因業務調整，暫不接受個人委托測試望見諒。

內皮細胞流式檢測實驗方法與結果分析

檢測樣品

本實驗檢測樣品為人臍靜脈內皮細胞（HUVECs），所有細胞均來源于健康供體，經無菌分離和體外培養擴增后獲得。細胞培養條件為37℃、5% CO?的恒溫恒濕環境，使用含10%胎牛血清（FBS）的Endothelial Cell Growth Medium（EGM-2）培養基。實驗前通過顯微鏡觀察確認細胞形態及融合度達80%以上。

檢測項目

本次流式檢測主要針對以下指標：

1. 內皮細胞表面標志物表達：包括CD31（PECAM-1）、CD34及vWF（血管性血友病因子）的表達水平；
2. 細胞凋亡率：通過Annexin V-FITC/PI雙染法檢測凋亡細胞比例；
3. 細胞周期分布：分析G0/G1期、S期及G2/M期的細胞比例；
4. 活性氧（ROS）水平：采用DCFH-DA探針檢測細胞內ROS含量。

檢測方法

1. 樣品制備：

   • 收集對數生長期細胞，胰酶消化后離心（1000 rpm，5 min），PBS洗滌兩次；
   • 根據不同檢測項目分組處理：
     • 表面標志物檢測：細胞重懸后加入熒光標記抗體（CD31-APC、CD34-PE、vWF-FITC），避光孵育30 min；
     • 凋亡檢測：加入Annexin V-FITC和PI染色液，室溫避光反應15 min；
     • 細胞周期檢測：預冷70%乙醇固定，PI/RNase染色液避光孵育30 min；
     • ROS檢測：DCFH-DA探針孵育30 min后清洗。

2. 流式上機檢測：所有樣品經300目濾網過濾后上樣，避免細胞團塊干擾信號。

檢測儀器

實驗采用BD FACSCanto II流式細胞儀（美國BD公司），配置三激光（488 nm、633 nm、405 nm）和六色檢測系統。儀器參數設置如下：

• 前向散射（FSC）與側向散射（SSC）用于區分細胞大小及顆粒度；
• 熒光通道：FITC（530/30 nm）、PE（585/42 nm）、APC（660/20 nm）；
• 數據采集與分析軟件：BD FACSDiva 8.0.1。

結果與討論

實驗數據顯示，HUVECs表面標志物CD31、CD34及vWF的陽性表達率分別為98.2%、92.5%和95.3%，符合內皮細胞特性。凋亡率檢測顯示正常培養條件下細胞凋亡比例為4.7%，提示細胞狀態良好。細胞周期分析中，G0/G1期占比78.3%，表明大部分細胞處于靜息狀態。ROS水平檢測結果為熒光強度均值2560±120，為后續氧化應激研究提供基線數據。

本實驗通過流式細胞術高效評估了內皮細胞的生物學特征，為血管相關疾病機制研究及藥物篩選提供了可靠數據支持。

復制
導出
重新生成

實驗儀器

測試流程

注意事項

1.具體的試驗周期以工程師告知的為準。

2.文章中的圖片或者標準以及具體的試驗方案僅供參考，因為每個樣品和項目都有所不同，所以最終以工程師告知的為準。

3.關于（樣品量）的需求，最好是先咨詢我們的工程師確定，避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗周期一般是五個工作日左右，部分樣品有所差異

5.如果對于（內皮細胞流式檢測）還有什么疑問，可以咨詢我們的工程師為您一一解答。