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流式細胞試驗檢測

原創發布者:北檢院    發布時間:2025-04-09     點擊數:

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注意:因業務調整,暫不接受個人委托測試望見諒。

  1. 檢測樣品:需要明確樣品的類型,比如細胞類型、來源,例如血液、培養的細胞等。可能還要提到樣品的處理方式,如抗凝劑使用、保存條件等。
  2. 檢測項目:常見的流式檢測項目有哪些?比如細胞表面標記物(CD分子)、細胞內細胞因子、細胞周期分析、凋亡檢測等。需要具體列出幾個例子,并簡要說明其應用。
  3. 檢測方法:流式細胞術的基本步驟,包括樣品制備、染色過程(如抗體孵育)、上機檢測。可能需要詳細說明每一步驟,比如細胞固定、破膜處理(如果是胞內染色),以及使用的緩沖液等。
  4. 檢測儀器:需要列出常用的流式細胞儀型號,比如BD的FACSCanto、Beckman Coulter的CytoFLEX等,并簡要介紹儀器的參數,如激光器配置、檢測通道數、分析軟件等。
    用戶還要求避免使用代碼和注釋,所以內容要保持專業但通俗易懂,適合網頁文章的閱讀習慣。可能需要加入一些實際應用的例子,比如在免疫學研究或臨床診斷中的應用,以增加文章的實用性。
    需要檢查是否有遺漏的部分,比如數據分析和結果解讀是否要包含,但用戶沒有特別提到,可能不需要詳細展開。重點放在樣品、項目、方法和儀器上。
    最后,確保語言流暢,符合中文語法,使用正確的術語,同時保持段落簡潔,適當使用小標題分隔內容,使結構清晰。
 

流式細胞試驗檢測在細胞分析中的應用

引言

流式細胞試驗是一種基于激光散射和熒光信號的高通量檢測技術,能夠對單細胞或多顆粒懸液進行快速、多參數的定量分析。該技術廣泛應用于免疫學、腫瘤學、藥物研發及臨床診斷等領域。本文將從檢測樣品、檢測項目、檢測方法及儀器等方面介紹流式細胞試驗的核心內容。

檢測樣品

流式細胞試驗的檢測樣品通常為單細胞懸液,包括但不限于以下類型:

  1. 外周血或骨髓樣本:通過密度梯度離心法分離出單個核細胞。
  2. 培養細胞:貼壁細胞需經胰酶消化后制備成懸液,懸浮細胞可直接使用。
  3. 組織樣本:通過機械破碎或酶消化法(如膠原酶處理)獲取單細胞。
  4. 體液或其他生物液體:如胸腹水、腦脊液等需經離心濃縮處理。

所有樣品需避免聚集,并在檢測前用磷酸鹽緩沖液(PBS)調整至適當濃度(通常為1×10^6~1×10^7 cells/mL)。

檢測項目

流式細胞試驗可同時檢測多個靶標,常見項目包括:

  • 細胞表面標志物:如免疫細胞分型(CD3、CD4、CD8、CD19等)。
  • 細胞內因子:如細胞因子(IFN-γ、IL-2)、轉錄因子(FoxP3)的檢測需固定和破膜處理。
  • 細胞功能分析:包括細胞凋亡(Annexin V/PI雙染)、細胞周期(PI或DAPI染色)、活性氧(ROS)水平等。
  • 細胞增殖與信號通路:通過CFSE染色或磷酸化蛋白(p-STAT、p-AKT)檢測實現。

檢測方法

1. 樣品預處理

  • 表面標志物檢測:細胞懸液與熒光標記抗體在4℃避光孵育15~30分鐘,洗滌后重懸于PBS。
  • 胞內蛋白檢測:需先用4%多聚甲醛固定細胞,再用通透劑(如Triton X-100)破膜,隨后進行抗體孵育。
  • DNA含量分析:使用RNA酶處理后,加入碘化丙啶(PI)或DAPI染色。

2. 上機檢測

將處理后的樣品通過流式細胞儀進樣針吸入,儀器自動采集前向散射光(FSC)、側向散射光(SSC)及熒光信號。

3. 數據分析

通過FlowJo、BD FACSDiva或CytExpert等軟件,設門排除碎片和粘連體,分析目標細胞群的比例及熒光強度。

檢測儀器

流式細胞試驗的核心設備為流式細胞儀,常見型號及特點如下:

  1. BD FACSCanto™ II:配置3激光(488nm、633nm、405nm),可檢測8色熒光,適用于臨床免疫分型。
  2. Beckman Coulter CytoFLEX:模塊化設計,支持13色分析,具備高靈敏度和低樣本量需求。
  3. Sony ID7000™:支持7激光64色檢測,適用于多參數高通量研究。

儀器需定期校準(如使用CST微球)并優化電壓和補償參數,以確保數據準確性。

總結

流式細胞試驗通過多參數分析為細胞學研究提供了高效的技術支持。未來,隨著光譜流式和質譜流式技術的發展,其應用范圍將進一步拓展,為精準醫學和轉化研究提供更全面的數據支撐。

實驗儀器

實驗室儀器 實驗室儀器 實驗室儀器 實驗室儀器

測試流程

流式細胞試驗檢測流程

注意事項

1.具體的試驗周期以工程師告知的為準。

2.文章中的圖片或者標準以及具體的試驗方案僅供參考,因為每個樣品和項目都有所不同,所以最終以工程師告知的為準。

3.關于(樣品量)的需求,最好是先咨詢我們的工程師確定,避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗周期一般是五個工作日左右,部分樣品有所差異

5.如果對于(流式細胞試驗檢測)還有什么疑問,可以咨詢我們的工程師為您一一解答。

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