檢測自噬的檢測標準

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信息概要

自噬檢測是評估細胞內自噬活動水平的關鍵技術，用于研究細胞代謝、疾病機制及藥物開發等領域。該檢測通過分析自噬相關標志物、結構變化及功能狀態，為科研和臨床提供重要數據支持。檢測自噬的標準化流程可確保結果的可重復性和準確性，對理解細胞穩態、癌癥、神經退行性疾病等具有重要意義。

檢測項目

LC3-I/LC3-II蛋白比值，p62/SQSTM1蛋白降解水平，自噬小體數量，自噬流速率，溶酶體活性，ATG蛋白表達量，Beclin-1相互作用分析，自噬相關基因表達（如ATG5、ATG7），線粒體自噬（Mitophagy）標志物，ER-phagy標志物，自噬抑制劑/誘導劑效應驗證，透射電鏡觀察自噬結構，熒光標記LC3點狀聚集，細胞存活率與自噬關聯性，自噬溶酶體融合效率，ROS水平與自噬關系，mTOR信號通路活性，ULK1磷酸化狀態，細胞能量代謝指標（ATP/AMP比值），自噬相關microRNA表達譜。

檢測范圍

哺乳動物細胞系（如HeLa、HEK293），原代細胞（肝細胞、神經元），腫瘤組織樣本，轉基因動物模型（小鼠、斑馬魚），臨床活檢組織，類器官模型，植物細胞樣本，酵母模型，血液樣本（外周血單核細胞），腦脊液細胞，干細胞分化模型，藥物篩選模型，病原體感染細胞模型，衰老細胞模型，免疫細胞（T細胞、巨噬細胞），腦組織切片，腸道微生物共培養系統，3D細胞培養模型，線粒體分離樣本，外泌體與自噬關聯分析。

檢測方法

Western Blot：通過LC3-II/I比值及p62蛋白定量分析自噬流。

透射電子顯微鏡（TEM）：直接觀察自噬小體及溶酶體超微結構。

熒光顯微鏡成像：利用GFP-LC3轉染細胞檢測自噬小體形成。

流式細胞術：定量分析LC3陽性細胞比例及溶酶體pH值。

qRT-PCR：檢測自噬相關基因（ATG家族）的mRNA表達水平。

免疫組化（IHC）：組織切片中定位自噬標志物表達。

酶標儀檢測：基于LysoTracker探針的溶酶體活性分析。

細胞活力檢測：CCK-8/MTT法評估自噬與細胞存活關聯性。

自噬報告基因系統：使用mRFP-GFP-LC3雙熒光探針區分自噬流階段。

蛋白質降解速率測定：放射性標記追蹤長壽命蛋白降解。

免疫熒光共定位：分析LC3與溶酶體標記物（LAMP1）共定位程度。

ATP含量檢測：通過生物發光法評估細胞能量狀態與自噬關系。

自噬小體計數：圖像分析軟件定量熒光點狀結構數量。

溶酶體酶活性檢測：Cathepsin B/L活性比色法。

代謝組學分析：LC-MS檢測自噬相關代謝物變化。

檢測儀器

透射電子顯微鏡，熒光顯微鏡，流式細胞儀，酶標儀，實時熒光定量PCR儀，蛋白質電泳系統，化學發光成像儀，超速離心機，細胞培養箱，激光共聚焦顯微鏡，顯微成像分析系統，高效液相色譜儀（HPLC），質譜儀（LC-MS），多功能酶標儀，生物分析儀。

實驗儀器

測試流程

注意事項

1.具體的試驗周期以工程師告知的為準。

2.文章中的圖片或者標準以及具體的試驗方案僅供參考，因為每個樣品和項目都有所不同，所以最終以工程師告知的為準。

3.關于（樣品量）的需求，最好是先咨詢我們的工程師確定，避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗周期一般是五個工作日左右，部分樣品有所差異

5.如果對于（檢測自噬的檢測標準）還有什么疑問，可以咨詢我們的工程師為您一一解答。