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核酸檢測實驗操作檢測標準

原創發布者:北檢院    發布時間:2025-04-25     點擊數:

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核酸檢測實驗操作標準指南

檢測樣品

核酸檢測的常見樣品類型包括:

  1. 上呼吸道樣本:咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物等;
  2. 下呼吸道樣本:痰液、支氣管肺泡灌洗液等;
  3. 血液樣本:全血或血清(適用于特定病原體檢測);
  4. 其他生物樣本:如糞便(針對腸道病原體)或組織樣本。

采樣需使用無菌拭子或專用保存管,采集后需立即置于病毒保存液中,并于2–8℃暫存。若需長時間運輸或保存,需在–70℃以下冷凍。

檢測項目

核酸檢測的核心項目包括:

  1. 核酸提取:從樣本中分離純化目標核酸(RNA或DNA);
  2. 目標基因檢測:通過特異性引物和探針擴增病原體基因片段(如新冠病毒的ORF1ab、N基因);
  3. 內參基因檢測:驗證樣本采集及提取質量(如人類RNase P基因);
  4. 質控標準:包括陰性對照、陽性對照和重復性驗證。

檢測方法

核酸檢測遵循以下標準化流程: 1. 核酸提取 采用磁珠法或離心柱法,通過裂解液釋放核酸,結合磁珠吸附技術純化目標核酸。操作需在生物安全柜內完成,避免交叉污染。

2. 實時熒光RT-PCR (1)配置反應體系:將提取的核酸與預混試劑(含酶、引物、探針)混合; (2)擴增程序:設置變性、退火、延伸三步循環(通常45–50個循環),儀器實時監測熒光信號; (3)結果判定:根據擴增曲線和Ct值(閾值循環數)判斷陰陽性。

3. 質量控制 每批次實驗需包含陰性對照(無模板)和陽性對照(已知濃度標準品)。若陰性對照出現擴增,則實驗無效;陽性對照需符合預設Ct值范圍。

檢測儀器

核酸檢測依賴高精度儀器完成,主要包括:

  1. 核酸提取儀:自動化完成樣本裂解、純化步驟(如Thermo KingFisher、Qiagen QIAcube);
  2. 實時熒光PCR儀:用于核酸擴增與熒光信號采集(如ABI 7500、Roche LightCycler 480);
  3. 生物安全柜:提供無菌操作環境,保護實驗人員及樣本安全;
  4. 離心機與振蕩器:用于樣本預處理及試劑混合。

注意事項

  1. 實驗人員需穿戴防護裝備(防護服、手套、護目鏡);
  2. 實驗廢棄物需經高壓滅菌處理;
  3. 檢測結果需結合臨床表征綜合判斷,低病毒載量樣本可能需重復檢測。

通過標準化操作流程與嚴格質控,核酸檢測可為疾病診斷、流行病學調查提供可靠依據。


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實驗儀器

實驗室儀器 實驗室儀器 實驗室儀器 實驗室儀器

測試流程

核酸檢測實驗操作檢測標準流程

注意事項

1.具體的試驗周期以工程師告知的為準。

2.文章中的圖片或者標準以及具體的試驗方案僅供參考,因為每個樣品和項目都有所不同,所以最終以工程師告知的為準。

3.關于(樣品量)的需求,最好是先咨詢我們的工程師確定,避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗周期一般是五個工作日左右,部分樣品有所差異

5.如果對于(核酸檢測實驗操作檢測標準)還有什么疑問,可以咨詢我們的工程師為您一一解答。

  • 服務保障 一對一品質服務
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